移液器作为实验室中最基础且关键的液体转移工具,其准确性和重复性直接影响实验结果的可靠性。艾本德(Eppendorf)作为实验室仪器品牌,其移液器以高精度、高耐用性和人性化设计著称。然而,即便品质优良,移液器在长期使用过程中仍会因磨损、污染或操作不当而产生误差。因此,定期进行校准与质量控制(质控)是保障实验数据准确性的必要措施。本文将围绕艾本德移液器的校准方法、质控要点及日常维护展开阐述。
一、校准的重要性与标准依据
移液器校准是指通过标准化方法检测其实际移液体积与标称体积之间的偏差,并评估其重复性。国际上普遍采用的标准包括ISO 8655《活塞式容积测量仪器》以及GLP(良好实验室规范)和GMP(药品生产质量管理规范)等法规要求。艾本德移液器的校准通常遵循ISO 8655-6中规定的“重量法”(Gravimetric Method),即通过精密天平称量水的质量,再根据水的密度换算为体积,从而判断移液器的准确性(系统误差)和精密度(随机误差)。 二、校准周期与适用场景
一般建议每3至12个月对移液器进行一次全面校准,具体周期取决于使用频率、操作环境及实验要求。例如,在临床诊断、药物研发或计量认证实验室中,应每3–6个月校准一次;而在教学或常规科研中,可适当延长至每年一次。此外,以下情况也需立即校准:
1. 移液器经过维修或更换部件后;
2. 出现明显操作异常(如漏液、卡顿);
3. 实验结果出现无法解释的偏差;
4. 经历剧烈温度变化或跌落等物理冲击。
三、校准操作的关键步骤
1. 环境准备:校准应在恒温(20–25℃)、湿度适中(45–60%RH)、无振动和气流干扰的环境中进行。所有器具(包括吸头、天平、去离子水)需提前平衡至室温至少2小时。
2. 选择合适吸头:必须使用艾本德原厂匹配吸头,以确保密封性和一致性。非原厂吸头可能导致漏气或体积偏差。
3. 预润洗:对于挥发性液体或高精度要求,建议先进行3–5次预润洗(即吸取并排出液体),使吸头内壁达到饱和状态,减少蒸发影响。
4. 执行重量法测试:按照ISO 8655要求,对每个设定体积至少重复测量10次,记录每次称重结果。计算平均值、标准偏差和变异系数(CV%)。通常,CV%应小于1%,准确度偏差应在±1%以内(具体限值依移液器量程而定)。
5. 数据记录与报告:校准结果应详细记录,包括日期、操作人员、环境参数、设备编号、测试数据及结论,并归档保存,以满足审计追踪要求。
四、日常质控要点
1. 除定期校准外,日常使用中的质控同样重要:
2. 正确操作习惯:垂直持握移液器,缓慢平稳地按压和释放按钮,避免快速操作导致体积误差。
3. 定期清洁与保养:每月用70%乙醇或温和清洁剂擦拭外壳,防止污染物进入内部机构。若接触腐蚀性或高粘度液体,应及时拆卸清洗。
4. 吸头安装规范:用力适度旋转安装吸头,确保气密性,但避免过度用力损伤锥套。
5. 避免高温高压灭菌不当:部分艾本德移液器支持整支高温灭菌(如Reference®2系列),但需严格遵循说明书参数,否则可能损坏内部弹簧或密封圈。