你的位置:首页 > 技术文章 > 如何正确选择和使用赛多利斯超滤管进行样品处理?

技术文章

如何正确选择和使用赛多利斯超滤管进行样品处理?

技术文章
  赛多利斯超滤管是生物化学和分子生物学实验中常用的工具,用于浓缩和脱盐蛋白质、DNA和其他大分子溶液。正确选择和使用超滤管对于确保实验结果的准确性和可重复性至关重要。以下是关于如何正确选择和使用赛多利斯超滤管进行样品处理的一些建议:
 
  一、选择合适的超滤管
 
  分子量截留(MWCO):根据目标分子的分子量选择合适的MWCO。例如,如果需要浓缩的蛋白质分子量为30kDa,可以选择MWCO为10-30kDa的超滤管,以确保目标分子被截留而较小的杂质分子可以透过膜。
 
  材质:赛多利斯超滤管通常由聚醚砜(PES)或再生纤维素(RC)制成。根据样品的化学性质(如pH、离子强度、有机溶剂含量)选择合适的材质。
 
  容量:根据需要处理的样品量选择合适的超滤管容量。
 
  二、样品处理步骤
 
  样品准备:确保样品中不含有可能堵塞超滤膜的颗粒或沉淀物。必要时,可以通过离心或过滤预处理样品。
 
  加样:将样品加入超滤管的上室,注意不要超过最大容量标记。
 
  离心:将超滤管放入离心机中,根据制造商的推荐设置离心力和时间。离心过程中,小分子和溶剂将透过膜进入下室,而大分子则被截留在上室。
 
  浓缩/脱盐:重复离心步骤,直到达到所需的浓缩程度或脱盐效果。
 
  样品回收:使用移液器从上室中取出浓缩后的样品。如果需要,可以用适量的缓冲液洗涤超滤管以回收更多样品。
 
  超滤管清洗与保存:使用后立即用去离子水清洗超滤管,并根据制造商的说明进行消毒和保存。
 
  三、注意事项
 
  避免交叉污染:使用前确保超滤管是干净的,且未被其他样品污染。
 
  防止堵塞:避免处理含有大量颗粒或沉淀物的样品,以防止超滤膜堵塞。
 
  控制离心条件:过高的离心力或过长的离心时间可能导致超滤膜破裂或样品损失。
 
  样品回收效率:由于超滤膜的截留作用,部分样品可能会吸附在膜上或损失在离心过程中。因此,在处理珍贵样品时,应特别注意回收效率。
 
  通过遵循以上建议和注意事项,可以确保正确选择和使用赛多利斯超滤管进行样品处理,从而获得准确且可重复的实验结果。
  • 上一篇:没有了