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垂直电泳槽使用时要注意的事项有哪些

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   垂直电泳槽一般来说主要是用于对少量核酸及蛋白质样品进行垂直电泳,主要是蛋白样品的电泳,在进行种子的有些试验中会用到。垂直电泳槽从特点上来看,其中间是夹在一起的两块玻璃板,玻璃板两边由垫条隔开,在玻璃平板中间制备电泳凝胶,凝胶的大小通常是12cm~14 cm,厚度1mm~2 mm,近年来新研制的电泳槽,胶面更小、更薄,以节省试剂和缩短电泳时间。制胶时在凝胶溶液中放一个塑料梳子,在胶聚合后移去,形成上样品的凹槽。
  垂直电泳槽是一种与圆盘电泳槽在原理与结构上略有相似,却在制胶和电泳方面存在某些差异的电泳槽种类中的一种。它一般被应用于分子生物学等领域。由于垂直电泳槽在使用过程中的要求较高,在使用时应当注意一些事项。
  1、分离胶浓度的选择。低浓度胶对大分子量蛋白质分离效果好:高浓度胶对小分子量蛋白质分离效果好;
  2、清洗玻璃板。玻璃板应清洗干净,玻璃表面的油污会造成分离胶与浓缩胶界面的不平整。经用去污剂洗涤后的玻璃板先用蒸馏水冲洗,再用纱布蘸乙醇擦拭玻璃表面;
  3、TEMED的加入量。TEMED是促进丙烯酰胺聚合的加速剂。加*果随试剂保存时间而变化。对于陈旧试剂,可适当多加。事实上,配制分离胶时每块胶板按2滴加入,效果也不错;
  4、丙烯酰胺的毒性。丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺都是神经性毒剂,对皮肤有刺激作用。但在形成凝胶后则无毒。操作时应戴橡胶或塑料手套,尽量避免接触皮肤,并注意实验后洗手;
  5、电极缓冲液的配制。电极缓冲液的用量大、占体积、配制麻烦。如果经常跑胶,可考虑配制5X浓度的浓缩液。方法如下:将144g甘氨酸和30﹒2gTris溶于1升蒸馏水中。使用时稀释5倍。